HPLC arızalarına ve çözümlerine en eğilimli

Yüksek hassasiyetli bir enstrüman olarak, HPLC, kullanım sırasında doğru şekilde çalıştırılmazsa, bazı zahmetli küçük sorunlara kolayca yol açabilir. En yaygın problemlerden biri kolon sıkıştırma problemidir. Hızlı bir kromatografı hızlı bir şekilde nasıl giderir. HPLC sistemi esas olarak bir rezervuar şişesi, bir pompa, bir enjektör, bir sütun, bir sütun sıcaklık odası, bir dedektör ve bir veri işleme sisteminden oluşur. Tüm sistem için sütunlar, pompalar ve dedektörler, sorunlara eğilimli temel bileşenler ve ana konumlardır.

Sütun basıncının anahtarı, HPLC kullanırken çok dikkat edilmesi gereken alandır. Kolon basıncının stabilitesi, kromatografik tepe şekli, kolon verimliliği, ayırma verimliliği ve tutma süresi ile yakından ilişkilidir. Kolon basınç stabilitesi, basınç değerinin kararlı bir değerde sabit olduğu anlamına gelmez, daha ziyade basınç dalgalanma aralığının 345kPA veya 50psi arasında olduğu anlamına gelir (kolon basıncı kararlı ve yavaşça değiştiğinde gradyan elüsyonunun kullanılmasına izin verir). Çok yüksek veya çok düşük basınç bir sütun basıncı problemidir.

HPLC arızalarına ve çözümlerine en eğilimli

1, yüksek basınç HPLC kullanımında en yaygın sorundur. Bu, basınçta ani bir artış anlamına gelir. Genel olarak, aşağıdaki nedenler vardır: (1) Genel olarak, bunun nedeni akış kanalı tıkanmasıdır. Bu noktada, parçalı incelemeliyiz. A. İlk olarak, vakum pompasının girişini kesin. Bu noktada, peek tüp sıvı ile dolduruldu, böylece peek tüpünün çözücü şişesinden daha küçük olması için sıvının istedikleri gibi damlayıp damlamadığını görmek için. Sıvı yavaşça damlamıyor veya damlamıyorsa, çözücü filtre başlığı bloke edilir. Tedavi: Yarım saat boyunca% 30 nitrik asit içinde bekletin ve ultra saf su ile durulayın. Sıvı rastgele damlarsa, çözücü filtre kafası normaldir ve kontrol edilir; B. Mobil fazın kolondan geçmeyecek şekilde temizleme valfini açın ve basınç önemli ölçüde azalmazsa, filtre beyaz başı engellenir. Tedavi: Filtrelenmiş beyaz kafalar çıkarıldı ve yarım saat boyunca% 10 izopropanol ile sonike edildi. Basıncın 100psi'nin altına düştüğü varsayılarak, filtrelenmiş beyaz kafa normaldir ve kontrol edilmektedir; C. Sütunun çıkış ucunu çıkarın, basınç azalmazsa, sütun engellenir. Tedavi: Bir tampon tuz tıkanıklığı ise, basınç normal olana kadar% 95 durulayın. Eğer tıkanma daha yüksek korunmuş bazı malzemelerden kaynaklanıyorsa, mevcut mobil fazdan daha güçlü bir akış normal basınca doğru koşmak için kullanılmalıdır. Uzun süreli temizleme basıncı yukarıdaki yönteme göre azalmazsa, kolonun girişi ve çıkışının aksine enstrümana bağlandığı düşünülebilir ve sütun mobil faz ile temizlenebilir. Şu anda, sütun basıncı hala azalmazsa, sütun giriş elek plakası sadece değiştirilebilir, ancak işlem iyi olmadığında, sütun efektinin azaltılmasına yol açmak kolaydır, bu yüzden daha az kullanmaya çalışın. Zor problemler için sütun değiştirme düşünülebilir.

(2) Yanlış akış hızı ayarı: Doğru akış hızı sıfırlanabilir.

(3) Yanlış akış oranı: Farklı oranlarda akışların viskozite indeksi farklıdır ve daha yüksek viskozite ile akışın karşılık gelen sistem basıncı da daha büyüktür. Mümkünse, daha düşük viskozite çözücüleri değiştirilebilir veya yeniden ayarlanabilir ve hazırlanabilir.

(4) Sistem basıncı sıfır sürüklenme: Sıvı seviye sensörünün sıfırını ayarlayın.

2, basınç çok düşüktür (1) genellikle sistem sızıntısından kaynaklanır. Ne yapmalı: Her bağlantıyı, özellikle sütunun her iki ucundaki arayüzü bulun ve sızıntı alanını sıkın. Posta çıkarın ve PTFE filmini uygun kuvvetle sıkın veya satın.

(2) Gaz pompaya girer, ancak basınç şu anda yüksek ve alçakta genellikle kararsızdır. Daha cidden, pompa sıvıyı ememez. Tedavi yöntemi: Temizleme valfini açın ve 3 ~ 5ml/dk akış hızında temizleyin. Değilse, hava kabarcıkları, özel bir iğne tüpü kullanılarak egzoz valfine aspire edildi.

(3) Mobil faz çıkışı yok: Rezervuar şişesinde bir mobil faz olup olmadığını, lavabonun mobil faza daldırılıp daldırılmadığını ve pompanın çalışıp çalışmadığını kontrol edin.

(4) Referans valf kapalı değildir: referans valf yavaşlamadan sonra kapatılır. Genellikle 0.1'e iner. Referans valfini kapattıktan sonra ~ 0.2ml/ dakika.

Özet:

Bu yazıda, sadece sıvı kromatografisinde yaygın problemler analiz edilmektedir. Tabii ki, pratik uygulamamızda başka sorunlarla karşılaşacağız. Hata işlemesinde, aşağıdaki ilkeleri izlemeliyiz: varsayımsal faktör ve sorun arasındaki ilişkiyi belirlemek için her seferinde bir faktörü değiştirin; Genel olarak, sorun giderme için parçaları değiştirirken, atıkları önlemek için sökülmüş sağlam parçaları yerine geri koymaya dikkat etmeliyiz; İyi bir kayıt alışkanlığı oluşturmak, hata kullanmanın başarısının anahtarıdır. Sonuç olarak, HPLC kullanırken, örnek ön işlem ve ekipmanın uygun şekilde çalışmasına ve bakımına dikkat etmek önemlidir.